大鼠视网膜神经节细胞的培养

摘要

目的建立视网膜神经节细胞（ｒｅｔｉｎａｌｇａｎｇｌｉｏｎｃｅｌｓ，ＲＧＣｓ）的体外培养方法，为ＲＧＣｓ的体外实验研究奠定基础。方法采用胰酶消化法将１６只生后２～３天的ＳｐｒａｇｕｅＤａｗｌｅｙ大鼠视网膜制成细胞悬液后，接种于涂以鼠尾胶原的２４孔培养板，预先置入１ｃｍ×１ｃｍ的载玻片。细胞数约４×１０５个／孔，在３７℃、体积分数为５％的ＣＯ２培养箱中培养。于第１、３及５天行抗大鼠ＴＨＹ１单克隆抗体免疫细胞化学检查以鉴定ＲＧＣｓ，镜下计算每１０个高倍镜下（ｈｉｇｈｐｏｗｅｒ，ＨＰ）ＲＧＣｓ的细胞数和其轴突生长率。结果在鼠尾胶原上培养的ＲＧＣｓ生长良好，部分细胞伸出突起，且有些突起相互连接成网。培养第１天，ＲＧＣｓ数和轴突生长百分率分别为（４０１±９）个／１０ＨＰ和（２５．３４±０．７２）％，第３天为（３５１±６）个／１０ＨＰ和（３５．１６±２．２２）％，第５天为（１０９±８）个／１０ＨＰ和（６９．８４±０．９７）％。结论ＲＧＣｓ的体外培养能获成功，鼠尾胶原是ＲＧＣｓ体外生长的良好支持物。