反义ST6GalⅠ基因对HeLa细胞黏附和侵袭力的影响

摘要

目的 研究人α2,6-唾液酸转移酶(ST6Gal Ⅰ)反义寡核苷酸(ASODN)转染对ST6GalⅠ高表达的宫颈癌HeLa细胞的黏附和侵袭力的影响.方法 设计并合成靶向ST6Gal Ⅰ的ASODN及正义寡核苷酸(SODN),用脂质体Lipofectamine 2000包裹后转染HeLa细胞.实验设空白对照组、脂质体对照组、SODN组和ASODN组.应用RT-PCR测定细胞中ST6Gal Ⅰ mRNA水平,流式细胞术检测细胞表面α2,6-唾液酸含量,分别用CytoMatrixTM细胞黏附试剂盒和细胞侵袭分析试剂盒,检测细胞对细胞外基质(ECM)的黏附与侵袭力.结果 HeLa细胞被转染48 h后,与空白对照组、脂质体对照组和SODN组相比,ASODN组细胞中ST6Gal Ⅰ mRNA表达明显下调(P＜0.01);与3个对照组相比,ASODN组细胞表面α2,6-唾液酸的含量明显降低,同时细胞对ECM的黏附和侵袭力均降低(均P＜0.05).结论 靶向ST6Gal Ⅰ的ASODN能下调HeLa细胞ST6Gal Ⅰ基因的表达,降低细胞表面α2,6-唾液酸含量,继而降低细胞对ECM的黏附和侵袭力.