自噬在槲皮素诱导人膀胱癌BIU-87细胞凋亡中的作用

摘要

目的研究自噬在槲皮素诱导的人膀胱癌BIU-87细胞凋亡中的作用。方法以不同浓度的槲皮素处理人膀胱癌BIU-87细胞,采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测槲皮素对BIU-87细胞增殖的抑制作用,采用单丹磺酰尸胺（MDC）荧光染色、Hochest 33258染色分别观察槲皮素处理后BIU-87细胞的自噬和凋亡现象,采用流式细胞仪检测阻断自噬对BIU-87细胞凋亡的影响。以乳酸脱氢酶（LDH）检测试剂盒检测3-甲基腺嘌呤阻断自噬后对槲皮素细胞毒作用的影响。结果槲皮素对BIU-87细胞的增殖有明显的抑制作用,且此抑制作用呈明显的时间和浓度依赖性,200μmol/L槲皮素作用72 h时对BIU-87细胞的增殖抑制率达89.2%。槲皮素可以诱导BIU-87细胞发生自噬和凋亡,并且自噬先于凋亡出现;阻断自噬后可使BIU-87细胞的凋亡峰明显增高。在槲皮素处理前后,分别以3-甲基腺嘌呤阻断自噬,可观察到槲皮素对BIU-87细胞的细胞毒作用均增强。结论槲皮素能明显抑制BIU-87细胞的增殖,并在诱导细胞凋亡之前先诱导自噬发生。在槲皮素诱导BIU-87细胞凋亡的过程中,自噬在早期能够保护BIU-87细胞,延迟凋亡,减少因槲皮素导致的细胞死亡。