miR-155在肺腺癌A549细胞侵袭和转移中的作用

摘要

目的探讨miR-155在肺腺癌侵袭和转移中的作用。方法采用实时荧光定量PCR和原位杂交检测miR-155在肺腺癌和癌旁组织以及转移淋巴结中的表达,采用划痕实验和Transwell迁移实验检测miR-155对A549细胞的迁移和侵袭能力的影响;利用生物信息学软件预测miR-155的靶基因,并采用双荧光素酶检测靶基因;采用Western blot和实时荧光定量PCR检测miR-155调控靶基因鼠抗人第10号染色体同源缺失性磷酸酶张力蛋白（PTEN）的表达水平。结果实时荧光定量PCR检测显示,肺腺癌组织、癌旁正常组织和转移淋巴结中的miR-155表达水平分别为9.6±3.1、4.1±0.5和7.8±2.2。原位杂交检测显示,肺腺癌组织、癌旁正常组织和转移淋巴结中miR-155阳性表达率分别为（75.4±20.2）%、（23.2±15.3）%和（60.4±25.1）%。划痕实验检测显示,miR-155模拟物组、miR-155模拟物对照组、miR-155抑制剂组和miR-155抑制剂对照组24 h伤口愈合率分别为（43.2±2.2）%、（21.3±4.2）%、（24.3±5.3）%和（35.2±5.1）%,而48 h伤口愈合率分别为（75.2±4.5）%、（52.6±5.2）%、（39.4±4.2）%和（51.5±4.3）%。双荧光素酶报告基因检测显示,miR-155模拟物组与含有PTEN 3’UTR野生型和突变型质粒共转染的荧光素酶值分别为4.7±0.5和7.3±0.7,而miR·155模拟物对照组与含有PTEN 3’UTR野生型和突变型质粒共转染的荧光素酶值分别为7.8±0.9和7.5±0.8。实时荧光定量PCR检测显示,miR-155模拟物组、miR-155模拟物对照组、miR-155抑制剂组和miR-155抑制剂对照组的PTEN mRNA相对表达水平分别为0.5±0.3、1.0±0.1、2.2±0.2和1.2±0.1。Western blot检测显示,miR-155模拟物组、miR-155模拟物对照组、miR-155抑制剂组和miR-155抑制剂对照组的PTEN蛋白相对表达水平分别为0.4±0.1、1.0±0.3、2.8±0.2和1.4±0.1。miR-155模拟物组与miR-155模拟物对照组、miR-155抑制剂组与miR-155抑制剂对照组的PTEN mRNA和蛋白表达差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论miR-155可能是通过下调靶基因PTEN的表达而促进肺腺癌的侵袭和转移。