地塞米松-聚乳酸-羟基乙酸纳米粒玻璃体内注射对激光诱导的大鼠脉络膜新生血管的抑制作用

摘要

目的 观察生物降解性多聚体材料聚乳酸-羟基乙酸(PLGA)包载的醋酸地塞米松(DA)(DA-PLGA)纳米粒玻璃体内注射对实验性脉络膜新生血管(CNV)的抑制效果,评价药物在玻璃体内的释药模式及其对视网膜的毒性反应.方法 采用改良的乳化/溶剂蒸发法制备载药量为50%的DA-PLGA纳米粒.雄性BN大鼠54只,每只动物随机选取一只眼作为实验眼,采用激光光凝法建立CNV模型.随机分为DA-PLGA纳米粒组(24只)、DA组(24只)及生理盐水对照组(6只),分别给予实验眼玻璃体内注射DA-PLGA纳米粒10 μl(含DA100μg)、DA10μl(含DA 100 μg)及10 μl生理盐水.于激光光凝后1、3、14、21、28、56 d,采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)检测大鼠实验眼玻璃体内DA药物浓度.激光光凝后14、56 d,通过荧光素眼底血管造影(FFA)观察CNV的生成率;之后处死动物,摘除眼球制作标本,进行光学显微镜和电子显微镜观察.结果 DA-PLGA纳米粒在眼内释药模式呈4相,即初始突释、稳态释药、第三相突释和渐弱释药,持续释药时间近2个月.激光光凝后14 d,DA-PLGA纳米粒组、DA组和对照组CNV生成率分别为28.2%、31.6%和66.7%.经x2检验,DA-PLGA纳米粒组和DA组CNV生成率较对照组明显降低(P＜0.01).激光光凝后56 d,光凝区纤维血管组织增生(FVP)的平均厚度在DA-PLGA纳米粒组、DA组和对照组中分别为(69.52±10.52)、(70.49±12.39)、(105.11±13.70)μm.经SNK-q检验,DA-PLGA纳米粒组和DA组FVP的厚度较对照组显著变薄(P＜0.01).激光光凝后14d,透射电子显微镜检查发现,DA组节细胞层和神经纤维层的线粒体明显空泡化,内质网肿胀,高尔基复合体排列紊乱,微管及微丝排列紊乱.结论 玻璃体内注射DA-PLGA纳米粒可以明显抑制实验性CNV的生长.与DA相比,DA-PLGA纳米粒具有药物毒性低、缓释及药效长久等特性.