89Zr标记EGFR及HER2抗体用于胃黏液腺癌的microPET显像研究

摘要

目的 筛选适合监测低葡萄糖代谢的胃黏液腺癌小鼠模型的89 Zr标记表皮生长因子受体(EGFR)和人表皮生长因子受体2(HER2)单克隆抗体(简称单抗)分子探针.方法 通过细胞爬片和移植瘤肿瘤切片验证MGC803胃癌细胞株的EGFR和HER2表达情况;用89Zr标记去铁胺-西妥昔单抗(DFO-Cetuximab)和去铁胺-帕妥珠单抗(DFO-Pertuzumab),制得分别靶向EGFR和HER2的89Zr-DFO-Cetuximab和89Zr-DFO-Pertuzumab,测定其放化纯;通过细胞结合实验、阻断实验验证89 Zr-DFO-Cetuximab和89Zr-DFO-Pertuzumab与MGC803的结合力和特异性;将12只MGC803荷瘤裸鼠模型分3组(每组4只),分别注射89 Zr-DFO-Cetuximab(7.4 MBq/只,74μg/只)、89Zr-DFO-Pertuzumab(7.4 MBq/只,70 μg/只)和18F-脱氧葡萄糖(FDG)(7.4 MBq/只),于注射后4、24和48 h进行micro-PET显像(18F-FDG显像为注射后1h);另取8只荷瘤裸鼠,分为s9 Zr-DFO-Cetuximab组和89 Zr-DFO-Pertuzumab组(各4只),于探针注射后48 h进行生物分布研究.采用两独立样本t检验进行组间生物分布比较.结果 肿瘤切片免疫荧光染色示MGC803胃癌细胞株EGFR表达量高于HER2.89Zr-DFO-Cetuximab和89Zr-DFO-Pertuzumab放化纯均大于95％,比活度分别为100和95 MBq/mg;2种探针在生理盐水和胎牛血清(FBS)中稳定性好,放置72 h放化纯仍高于80％.MicroPET显像示MGC803肿瘤部位89Zr-DFO-Cetuximab的摄取高于18 F-FDG和89 Zr-DFO-Pertuzumab.生物分布实验示,48 h肿瘤89Zr-DFO-Cetuximab摄取[每克组织百分注射剂量率(％ID/g)]为56.3±12.0,高于89Zr-DFO-Pertu-zumab摄取(22.0±3.6;t=4.31,P＜0.05).结论 相较于89 Zr-DFO-Pertuzumab,89 Zr-DFO-Cetuximab具有更好的无创监测低葡萄糖代谢胃黏液腺癌的潜能.