酶活性法测定 GAD抗体及其初步临床应用

摘要

目的建立测定谷氨酸脱羧酶（ＧＡＤ）抗体的方法，以探讨该抗体对胰岛素依赖型糖尿病（ＩＤＤＭ）的预测、早期诊断及其发病机制研究的意义。方法用专用酶反应试管建立放射性同位素底物测定ＧＡＤ活性的分析方法。结果底物浓度为４ｍｍｏｌ／ｍｌ（３７ｋＢｑ）时，酶活性测定在一定浓度范围内剂量效应呈直线关系（ｒ＝０９８９）。结合免疫沉淀与酶活性分析，建立了免疫沉淀酶活性分析测定ＧＡＤ抗体的方法，２份ＩＤＤＭ患者ＧＡＤ抗体阳性血清与酶活性免疫沉淀指数存在剂量效应关系。用免疫沉淀酶法测定１５例正常人及２０例病程１年以内的ＩＤＤＭ患者血清，两组酶活性免疫沉淀指数分别为０１９３±００８７和０３８１±０１２１，差异有显著性（Ｐ＜００１）。按照超过正常人组免疫沉淀指数ｘ＋２ｓ为阳性区分，２０例ＩＤＤＭ患者血清中ＧＡＤ抗体阳性９例，占４５％。结论该方法简单，能直接反映酶活性的改变，无需高纯度的ＧＡＤ，特别适用于刚开始从事ＧＡＤ抗体研究的实验室及阳性血清筛查。