99Tcm直接标记αvβ3受体拮抗剂环形RGD多肽

摘要

目的 探讨99Tcm直接标记αvβ3受体配体--含2个二硫键的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)-九肽(RGD-4CK)的可行性和不同标记条件对标记率的影响.方法 采用预锡化法99Tcm直接标记RGD-4CK,3 MM色谱纸层析测定99Tcm-RGD-4CK的Rf值,计算标记率与比活度.研究各种标记条件对99Tcm-RGD-4CK标记率的影响.通过高效液相色谱仪(HPLC)分析,Sep-Pak C18柱层析,进行体外稳定性实验、半胱氨酸置换实验以及血清蛋白结合实验,评价99Tcm-RGD-4CK的放射化学性质.结果 99Tcm-RGD-4CK在以丙酮和V(氨水)∶y(乙醇)∶V(水)=1∶2∶5为流动相中的Rf值分别为0与0.8～0.9,标记率为(97.8±0.4)%,基础标记条件下的比活度为(11.90±0.05)TBq/mmol.在以下条件下放化纯均＞95%:(1)酒石酸亚锡为150～300 μg;(2)预锡化反应pH值为2.0～3.5,温度60℃,保温时间6 h以上;(3)99TcmO4-活度为37～185 MBq,体积在200 μl内;(4)标记温度为95℃,标记时间30 min.99Tcm-RGD-4CK HPLC的保留时间与其洗脱液的放射峰基本一致;99Tcm-RGD-4CK室温放置6 h,放化纯仍＞95%;Sep-Pak C18柱层析测定的99TcmO4-峰仅比3 MM纸层析高0.5%;标记物与300 mmol/L半胱氨酸37℃保温1 h,99TcmO4-峰仅增加1.88%;99Tcm-RGD-4CK与血清蛋白无明显结合.结论 预锡化法99Tcm直接标记RGD-4CK方法简便、标记率高,无需分离纯化即可直接应用,还可用于制备冻干品药盒.标记产物99Tcm-RGD-4CK具有良好的放射化学性质.