基于人卵巢颗粒细胞KGN建立的卵泡刺激素体外生物活性效价测定法

摘要

目的:基于哺乳动物体内激素具有刺激卵巢颗粒细胞产生黄体酮(孕酮)的机理,建立尿促性素(human menopausal gonadotropin,HMG)刺激人卵巢颗粒细胞KGN分泌孕酮(progesterone,PG)法,用于评价HMG中活性成分卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)的效价.方法:用不同浓度的HMG溶液刺激KGN细胞,检测分泌上清中的PG含量,建立FSH的体外生物学活性效价测定方法;参照《中华人民共和国药典》2020年版四部通则9101分析方法验证和9401生物制品生物活性/效价测定方法,验证指导原则对所建立的方法进行专属性、精密度、耐用性等方法学研究;以HMG国家标准品作为基准,检测HMG国际标准品和制剂(合格和不合格)的效价.结果:不同浓度的HMG作用KGN细胞后具有时间和剂量依赖性.结论:本方法的专属性、精密度和耐用性符合《中华人民共和国药典》四部通则的要求;以HMG国家标准品为基准,能有效检测HMG国际标准品和注射用HMG的效价,与药典方法一致.