siRNA靶向下调nNav1.5影响胶质瘤细胞增殖与凋亡研究

摘要

目的 研究下调电压-门控钠离子通道(VGSCs)幼稚型钠离子通道1.5 (nNav1.5)的表达对胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响.方法 用免疫荧光技术检测nNav1.5在U251细胞的表达;设计合成nNav1.5的靶向小干扰核糖核酸(siRNA),脂质体瞬时转染至U251细胞,用实时定量逆转录酶-聚合酶链反应(Real-time RT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测nNav1.5的mRNA和蛋白水平变化,并判断siRNA干扰效果;用四唑盐比色法(MTT)和流式细胞仪检测siRNA对细胞增殖和凋亡的影响.结果 nNav1.5主要在U251细胞核中表达;siRNA可显著下调nNav1.5的mRNA和蛋白表达水平,并抑制细胞增殖、促进细胞凋亡.结论 nNav1.5在胶质瘤的发生发展过程中起着促进作用,可能成为胶质瘤诊断和治疗的一个新靶点.