内皮抑素和血管生成抑素融合基因修饰的单纯疱疹病毒对胶质瘤干细胞杀伤作用的实验研究

摘要

目的探讨内皮抑素和血管生成抑素（Endo-Angio）融合基因修饰的单纯疱疹病毒（VAE）对胶质瘤干细胞（GSCs）荷瘤裸鼠胶质瘤的溶瘤作用。方法采用人脑胶质瘤标本经原代培养获得稳定传代的GSCs,构建裸小鼠脑内原位GSCs移植瘤模型,瘤内注射VAE治疗,通过MRI观察VAE对GSCs荷瘤裸鼠肿瘤体积的影响,RT-PCR和Western blot检测Endo-Angio融合蛋白的表达,免疫组化CD31染色检测其对微血管密度（MVD）的影响;观察病毒处理后荷瘤裸小鼠的生存情况。结果（1）从36例胶质母细胞瘤标本中培养出6例稳定传代的GSCs,能够表达CD133,具有自我更新和多向分化能力。（2）VAE感染GSCs荷瘤裸鼠10 d后,有Endo-Angio融合基因和蛋白的表达,该融合蛋白使MVD明显降低（P＜0.05）。（3）MRI检查发现VAE感染GSCs荷瘤裸鼠后,颅内肿瘤体积明显减小。（4）GSCs荷瘤裸鼠感染VAE后生存时间明显延长（P＜0.05）。结论 VAE能感染GSCs荷瘤裸鼠并表达Endo-Anglo融合蛋白,杀伤GSCs的同时抑制肿瘤血管生成,为脑胶质瘤病毒-基因治疗开辟了新的途径。