腺病毒介导BDNF基因转移对大鼠创伤性脑损伤后iNOS表达及细胞凋亡的影响

摘要

研究重组腺病毒介导的脑源性神经营养因子 (brainderivedneurotrophicfactor,BDNF)基因转移对创伤性脑损伤 (TBI)后诱导型一氧化氮合酶 (induciblenitricoxidesynthase,iNOS)表达及细胞凋亡的影响。将重组腺病毒载体 4 μl注入承受单侧大脑皮质重锤打击的大鼠海马 ,对照组注射病毒缓冲液。伤后 3h及 1,3,7,14d利用免疫组化单标 /双标染色 ,原位杂交 /组化染色及DNA末端原位标记等方法 ,检测伤侧大脑皮质和海马各区iN OS、BDNF及凋亡相关信号表达的改变。与对照组相比 ,各损伤组大脑皮质及海马各区iNOS阳性细胞于伤后 3h开始显著增多 ,7d达高峰。多数iNOS阳性细胞同时呈现凋亡相关蛋白阳性反应或TUNEL阳性反应 ,但很少同时表达BDNFmRNA。注射病毒载体组伤后 3,7d ,海马CA1区和DH区表达iNOS、凋亡相关蛋白的细胞及凋亡细胞显著减少 (P均 <0 .0 1) ,而表达BDNFmRNA的神经元显著增多。提示 ,TBI诱导海马细胞表达iNOS及诱导海马细胞凋亡 ;腺病毒介导的BDNF基因转移通过抑制iNOS表达、增加BDNF表达及减少细胞凋亡的机制保护海马神经元。