新生大鼠大脑少突胶质细胞系的分离纯化和定向分化培养

摘要

在体外培养条件下获取纯度较高的少突胶质细胞系细胞并探索其分化规律。新生大鼠大脑皮质原代混合胶质细胞培养 7～ 9d或 14～ 15d ,利用振荡和差速贴壁分离纯化少突胶质前体细胞 ,再进行无血清化学条件培养基培养。原代培养 7～ 9d时细胞分层形成 ,O 2A祖细胞 (oligodendrocyte/type 2astrocyteprogenitor)分散位于星形胶质细胞单层上 ,振荡分离后纯化率大于 95% ,分离后的O 2A祖细胞神经节苷脂GD3抗体阳性 ,无血清培养 3d后分化为“蜘蛛状”细胞 ,半乳糖脑苷脂抗体阳性。原代培养 14～ 15d时 ,星形胶质细胞层上出现葡萄样前O 2A祖细胞和少量星形胶质细胞。混合胶质细胞培养时细胞完全分层的出现是振荡分离O 2A祖细胞的适宜条件。分离纯化的O