脑梗死大鼠早期静脉移植BM-MSCs可诱导皮层梗死区表达BDNF的Iba-1+小胶质细胞显著增加

摘要

目的 探讨脑梗死大鼠早期静脉移植同种异体骨髓间充质干细胞（BM-MSCs）后皮层梗死区表达脑源性神经营养因子（BDNF）的主要细胞类型及BM-MSCs移植对其数量和比例的影响。方法 （1）实验一：将15只SD大鼠按随机数字表法分为假手术1组、梗死对照1组、BM-MSCs移植1组,每组5只。后2组制备成远端大脑中动脉闭塞模型,BM-MSCs移植1组于造模后1 h经尾静脉注射1×106个细胞标记试剂CM-DiI（红色荧光）标记的BM-MSCs。各组大鼠于造模后48 h灌注取脑,采用免疫荧光染色检测皮层梗死区BDNF和CM-DiI标记的BM-MSCs的双标阳性染色情况。（2）实验二：将15只SD大鼠按随机数字表法分为假手术2组、梗死对照2组、BM-MSCs移植2组,每组5只。后2组制备成远端大脑中动脉闭塞模型,BM-MSCs移植2组于造模后1 h经尾静脉注射1×106个未标记的BM-MSCs。各组大鼠于造模后48 h灌注取脑,采用免疫荧光染色检测皮层梗死区BDNF和离子钙适配分子1（Iba-1）+、CD68+小胶质细胞及神经元特异核蛋白（NeuN）+神经元的双标阳性染色情况。结果 （1）BM-MSCs移植1组大鼠脑内可见红色荧光标记的BM-MSCs,散在分布于皮层梗死区及梗死周边区,其中皮层梗死区中约有9.70%±3.47%的BM-MSCs表达BDNF,占所有BDNF+细胞的13.32%±4.48%。（2）BM-MSCs移植2组大鼠脑内皮层梗死区中,38.40%±9.04%的BDNF+细胞为Iba-1+小胶质细胞,11.65%±2.76%的BDNF+细胞为CD68+小胶质细胞,28.96%±6.99%的BDNF+细胞为NeuN+神经元。BM-MSCs移植2组皮层梗死区BDNF+/Iba-1+小胶质细胞数量[（92.06±36.52）个/mm2]及其占全部Iba-1+小胶质细胞的比例（79.21%±12.27%）均明显高于梗死对照2组[（31.13±10.23）个/mm2、60.15%±28.20%],差异均有统计学意义（P＆0.05）。结论 脑梗死大鼠早期静脉移植的同种异体BM-MSCs可迁移至脑内并在皮层梗死区表达BDNF,且该区域表达BDNF的其他细胞类型主要为神经元和小胶质细胞。BM-MSCs移植可促进分泌BDNF的Iba-1+小胶质细胞的数量和比例显著增加,这可能是其疗效产生的机制之一。