不同来源成体神经干细胞神经生物学特性比较的实验研究

摘要

目的比较和评价来源于同一SD大鼠成体骨髓、脂肪和大脑的神经干细胞在体外自我更新、向神经元或神经胶质细胞分化的能力,对比三者体外分泌神经营养因子的能力,进一步评估和对比它们在移植修复中枢神经系统损伤的潜能。方法选取来源于同一SD大鼠成体脑室下区、骨髓和脂肪3个部位的组织,体外分别诱导分化为脑室下区源性神经干细胞（SVZ-NSCs）、骨髓源性神经干细胞（BM-NSCs）和脂肪源性神经干细胞（AD-NSCs）,比较三者的自我更新和分化情况;免疫细胞化学方法、Westernblot检测巢蛋白（nestin）、β-微管蛋白（β-tubulin）、GFAP和半乳糖脑苷脂（GalC）4种细胞表面标记物的表达;ELISA法定量检测体外培养3种组织来源的神经干细胞的BDNF和NGF的分泌水平。结果 3种组织来源基质细胞形成的神经球从外形观察无明显差异;体外扩增率由高到低依次为SVZ-NSCs、BM-NSCs和AD-NSCs。ELISA检测结果表明3组细胞都能检测出BDNF和NGF分泌,但BM-NSCs组和AD-NSCs组明显低于SVZ-NSCs组,差异均有统计学意义（P＜0.05）;AD-NSCs组BDNF和NGF的水平均稍高于BM-NSCs组。结论在增殖能力、向神经细胞终极分化的能力和分泌神经营养因子的能力等方面,BM-NSCs和AD-NSCs均稍逊于中枢神经组织来源的SVZ-NSCs,但由于其具有可来源于自体、无免疫排斥和伦理道德问题等优点,可超越SVZ-NSCs成为目前最有临床应用前景的移植用种子细胞。AD-NSCs来源更为丰富,取材更为简便,也更容易被患者接受,可能是更好的选择。