重组腺病毒载体在小鼠海马组织内的转导特征及其细胞亲嗜性

摘要

目的探讨由鼠巨细胞病毒立早启动子（mCMV）介导的血清5型重组腺病毒（rAd5）载体在小鼠海马组织内的转导特征及其对不同细胞亲嗜性的差异。方法取健康成年雄性C57BL/6小鼠42只,立体定向注射一定体积和滴度的rAd5载体,以增强型绿色荧光蛋白（EGFP）为报告基因,于注射后第1、3、7、14、30、45、60天取脑行序列冰冻切片,用荧光显微镜观察EGFP在海马组织内的表达情况。同时采用免疫荧光双重标记法观察EGFP在不同类型细胞中的表达情况。结果 rAd5载体所携带的EGFP在注射后第1天已开始表达,在第3～45天均处在表达高峰,在注射后第60天,EGFP的表达量已明显减少。在海马组织内,rAd5载体介导的EGFP报告基因主要在齿状回颗粒细胞下层（SGZ）表达,在颗粒细胞层（GCL）表达很少,在海马CA1～CA3区锥体细胞层中无表达。免疫荧光双重标记显示,rAd5很少转导神经元,对SGZ的神经前体细胞则有很强的转导效率。结论 rAd5载体可以快速高效并长时程介导目的基因的表达,且对小鼠海马SGZ神经前体细胞具有高度亲嗜性。