微小磁珠法分离胚胎大鼠神经干细胞的实验研究

摘要

目的旨在以微小免疫磁珠(平均直径≤50 nm)分离提纯SD大鼠胚胎大脑皮层组织中的神经干细胞并进行培养,观察细胞的增殖分化情况并对其分化产物进行鉴定,评价该分离方法的可行性及其在神经干细胞研究中的应用价值. 方法取SD大鼠的胚胎大脑皮层组织制单细胞悬液,用微小磁珠分选出神经巢蛋白(nestin)阳性的细胞群,光镜下检测其纯度及活力后进行体外培养,特定条件下诱导分化并以免疫细胞方法检测产物的细胞类型. 结果分离的神经干细胞纯度为(89.2±4.8)%,细胞存活率(97.0±1.6)%,诱导分化产物中出现NSE阳性、GFAP阳性、巢蛋白(nestin)反应阳性细胞群落. 结论微小磁珠法分离提纯神经干细胞纯度高,获得细胞数多,并对细胞的生物活性无明显影响,提纯的细胞可用于后续实验.