Notch1/RBP-Jκ/Msx2信号通路在慢性肾脏病血管钙化大鼠模型主动脉中的表达及作用

摘要

目的观察Notch1信号通路在慢性肾脏病（CKD）血管钙化大鼠模型主动脉上的表达,探讨该信号通路在CKD主动脉钙化中的作用。方法将40只SD雄性大鼠随机分为正常对照组（Nor组,n=15）和慢性肾脏病血管钙化组（CKD+VC组,n=25）。分别在第4、6、8周后收集两组大鼠尿液检测24 h尿蛋白量;经腹主动脉采血检测肾功能及血钙、血磷。HE染色观察大鼠肾组织病理改变。茜素红染色观察大鼠主动脉钙盐沉积。免疫组化检测大鼠主动脉组织α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Runt相关转录因子2（Runx2）和Notch1、免疫球蛋白κJ区重组信号结合蛋白（RBP-Jκ）、Msh同源异型基因2（Msx2）、Jagged1和Notch1胞内域（N1-ICD）信号蛋白的表达。实时定量PCR检测大鼠主动脉α-SMA、平滑肌肌动蛋白22α（SM22α）、Runx2、碱性磷酸酶（ALP）和Notch1通路相关分子（Notch1、RBP-Jκ、Msx2和Jagged1）的mRNA表达。结果各时间点CKD+VC组大鼠24h尿蛋白量、血尿素氮和血肌酐均较Nor组显著升高（均P＜0.05）。各时间点Nor组大鼠主动脉均未见明显钙盐沉积,CKD+VC组大鼠均可见血管壁中膜层广泛存在呈线性连续分布的钙化斑块。Nor组主动脉壁上α-SMA广泛表达而Runx2仅少量表达;而与Nor组比较,CKD+VC组α-SMA表达显著减少而Runx2显著增加（均P＜0.05）。Notch1、RBP-Jκ、Msx2、Jagged1和N1-ICD信号蛋白在Nor组大鼠主动脉壁上均仅有微量散在表达;而CKD+VC组大鼠主动脉中上述蛋白在各时间点较Nor组均增加（均P＜0.05）。与Nor组相比,CKD+VC组大鼠主动脉中各时间点α-SMA和SM22αmRN A表达均明显降低（均P＜0.05）,而Runx2和ALP mRNA表达均显著升高（均P＜0.05）。各时间点CKD+VC组大鼠主动脉Notch1相关信号通路mRNA表达较Nor组均明显增加（均P＜0.05）。结论 CKD血管钙化大鼠主动脉钙化时存在平滑肌细胞的表型转变及Notch1/RBP-Jκ/Msx2信号通路的激活。该信号通路可能是CKD主动脉钙化重要的信号转导通路之一。