套式聚合酶链反应及限制酶分析检测新生儿肝炎巨细胞病毒感染

摘要

在人巨细胞病毒(HCMV)AD169株直接早期蛋白Eco RI J DNA片段内,自行设计二对引物,建立套式PCR检测HCMVDNA.经实验证明有高度的特异性与敏感性,对其它疱疹类病毒和正常人基因组DNA无交叉反应.一次性PCR检测HCMVAD 169株基因组的最小检出量为100fg,而套式PCR可达10fg,经PstⅠ酶切后,得到的片段与设计相符.对23例新生儿肝炎临床标本进行病毒分离,一次性PCR,套式PCR检测,结果表明套式PCR能进一步提高一次性PCR的特异性与敏感性,适用于新生儿肝炎HCMV感染的临测.