Math1/神经生长因子β基因共转染对噪声性听力损伤豚鼠耳蜗毛细胞的保护作用

摘要

目的观察Math1基因（mouse atonal homologue 1 gene,Math1）及神经生长因子β基因（nerve growth factorbeta gene,NGEβ）共转染对噪声性听力损伤豚鼠耳蜗毛细胞的保护作用。方法选用35只白色纯种豚鼠,制备豚鼠稳态噪声耳聋模型（110 dB SPL）,噪声暴露前后分别行听觉脑干电位（auditory brainstem response,ABR）检测,选择噪声暴露前后听阈阈移大于60 dB SPL的豚鼠。采用数字表法随机分为4组,其中A组10只,为双基因组（导入目的基因Ad-Math1/NGFβ）;B组10只,为Math1组（导入目的基因Ad-Math1）;C组10只,为NGF组（导人目的基因Ad-NGFβ）;D组5只,为对照组（导入空病毒）。基因转染后,进行ABR反应阈测定、免疫荧光染色检测基因蛋白表达,并用电镜扫描观察耳蜗毛细胞。结果基因转染后1周,Ad-Math1/NGFβ、Ad-Math1、Ad-NGEβ在豚鼠耳蜗内成功转染,耳蜗各回膜性组织均有表达,强度基本相等;A组双基因转染豚鼠ABR反应阈恢复显著快于B、C组单基因转染豚鼠ABR反应闽;转染后2周,A组豚鼠ABR[（37.6±2.8）dB SPL]已基本恢复正常,而B、C组豚鼠ABR[（45.3±2.5）dB SPL及（47.5±3.1）dB SPL]没有恢复正常,D组豚鼠ABR没有恢复[（75.7±3.4）dB SPL],A组与其他3组比较,差异均有统计学意义（P＜0.01）。扫描电镜示:噪声暴露后可见各组豚鼠耳蜗毛细胞静纤毛融合及缺失;基因转染后1周,A组豚鼠耳蜗可见新生毛细胞出现,其他组豚鼠耳蜗未见新生毛细胞;转染后2周,A组豚鼠耳蜗新生毛细胞数量增加,B、C、D组豚鼠耳蜗未见新生耳蜗毛细胞。结论 Math1/NGFβ基因共转染在噪声损伤后豚鼠耳蜗中能高效表达,对噪声性听力损伤的保护作用明显优于单基因转染。