胎鼠海马神经元培养方法的改进及鉴定

摘要

目的 优化海马神经元原代培养方法.方法 取孕17～18d胎鼠海马,经过剪碎、消化、离心和吹打过滤后种板,根据孵育后更换为无血清培养基的时间不同分为A组和B组.A组4h后更换,B组l2h后更换.观察并记录第2、3、4、5天两组神经元生长状况,并于第7d用神经元特异性烯醇化酶荧光染色法鉴定神经元,计算其纯度.结果 (1)4～6h后细胞已贴壁生长,2d后胞体增大,3d时突起长出,5d后突起变长变粗并有分支形成,相互连接呈网状.(2)7d后行免疫荧光染色,为阳性结果,证实为神经元,且A组神经元纯度显著高于B组(P＜0.05).结论 改进后的方法可培养出生长状况良好且纯度更高的神经元.