C1型尼曼-匹克氏症小鼠免疫系统功能异常初步研究

摘要

目的探讨Npc1基因突变型(Npc1-/-)和野生型(Npc1+/+)小鼠免疫系统差异,从免疫学角度完善对C1型尼曼-匹克病（Niemann-Pick disease type C1, NPC1）发病机制的研究,为人NPC1疾病的治疗提供重要支持。方法分别测量不同时间节点Npc1-/-与Npc1+/+小鼠体重、胸腺及脾脏重量,计算胸腺与脾脏指数;血常规检测小鼠外周血白细胞数量;qPCR检测小鼠外周血白细胞细胞因子表达;流式细胞术检测小鼠外周血与脾脏中CD4+、CD8+和CD19+淋巴细胞比例;免疫荧光及β-半乳糖苷酶染色检测小鼠脾脏的凋亡与衰老。结果与野生型小鼠相比,Day14±2时Npc1-/-小鼠脾脏和胸腺重量差异无统计学意义,Day42±2时,Npc1-/-小鼠脾脏重量显著增加,而胸腺重量却显著降低,至Day63±2时,脾脏重量显著降低;其次,Day42±2时Npc1-/-小鼠中性粒细胞数量的显著增加,淋巴细胞绝对数量虽与野生型小鼠相比差异无统计学意义,但所占百分比显著降低;其次,Day42±2时Npc1-/-小鼠血液白细胞中细胞因子（IL-1、IL-2、IFN-γ、TNFα、IL-4、GA及GB）的基因表达与野生型小鼠相比具有明显异常;进一步,流式细胞术检测发现,Day42±2时Npc1-/-小鼠无论在血液还是脾脏中,T（CD4+和CD8+）淋巴细胞数量较野生型小鼠显著减少,而B（CD19+）淋巴细胞却显著增多;最终,通过对小鼠脾脏组织的凋亡和衰老染色发现,Day63±2时Npc1-/-小鼠脾脏细胞凋亡和衰老明显。结论 Npc1基因突变引起的脂质代谢异常,导致Npc1-/-小鼠在其生长过程中免疫系统及功能活性与野生型小鼠存在明显异常。该结果可为NPC1患者在临床上的用药与治疗提供借鉴,最大限度地改善患者生活质量并延长患者生存时间。