尼曼-匹克C1型类似蛋白1介导依泽替米贝对RAW264.7细胞脂质蓄积的抑制作用

摘要

目的 观察肠道胆固醇吸收抑制剂依泽替米贝(ezetimibe)对RAW264.7细胞源性荷脂细胞脂质蓄积的影响并对其机制进行初步探讨.方法 采用油红O染色、高效液相色谱法检测细胞内脂滴数量和细胞内脂质含量,Western blot对NPC1L1(Niemann-Pick type C1 Like-1)进行定性和半定量检测.结果 RAW264.7细胞中有NPC1L1蛋白表达.不同浓度(0、0.003、0.01和0.03 mol·L~(-1))依泽替米贝预先孵育RAW264.7细胞24 h或最佳浓度(0.03 mol·L~(-1))预先孵育不同时间(0、6、12和24 h)后,换50 mg·L~(-1) oxLDL继续孵育24 h,结果显示不同浓度ezetimibe预先孵育后,细胞内脂滴数量与面积随着浓度的增加而逐渐减少;Ezetimibe预先孵育可减少细胞内脂质蓄积,并呈浓度和时间依赖性.其中0.03 mol·L~(-1) ezetimibe预先孵育24 h组作用最明显,CE百分比较oxLDL单独孵育组减少了约47%±0.1%.结论 小鼠源性巨噬细胞RAW264.7中存在NPC1L1蛋白表达;依泽替米贝能够减少RAW264.7细胞中NPC1L1蛋白表达;依泽替米贝抑制RAW264.7细胞中脂质蓄积.