GFP-hDaxx融合蛋白高表达下调活化巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1β

摘要

目的研究GFP-hDaxx融合蛋白瞬时高表达对活化巨噬细胞分泌活性的影响.方法构建GFP-hDaxx融合蛋白真核细胞表达载体pEGFP/hDaxx.将其质粒转染巨噬细胞,用荧光显微镜观察GFP-hDaxx融合蛋白或GFP的表达与定位,并利用Western blot检测表达产物.通过GFP-hDaxx融合蛋白在巨噬细胞内的瞬时高表达,在LPS诱导激活巨噬细胞后0.5 h、4 h、12 h时,测定活化巨噬细胞分泌细胞因子TNF-α和IL-1β的含量.结果GFP-hDaxx融合蛋白在巨噬细胞内瞬时高表达且定位于细胞核,GFP定位于细胞核与细胞浆.GFP-hDaxx融合蛋白在巨噬细胞内的高表达,使LPS诱导活化的巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1β量明显降低(在4 h及12 h时与对照组差异有显著性,P＜0.001).结论hDaxx瞬时高表达可下调活化巨噬细胞分泌细胞因子TNF-α和IL-1β.