JC病毒样颗粒可直接转运进入细胞核

摘要

目的探讨JC病毒(JCV)病毒样颗粒(VLP)是否可以直接转运进入细胞核. 方法应用JCV主要外壳蛋白VP1体外表达、重组VLP,在其表面标记异硫氰基荧光素(FITC),同时在其内部包裹荧光染料Cy3,感染培养的HeLa细胞和SVG细胞,荧光显微镜观察VLP入核转运. 结果 HeLa和SVG细胞感染包裹Cy3的FITC-VLP时,FITC与Cy3同时出现于细胞核内相同部位;而感染FITC-VP1与Cy3混合物时,FITC虽可在细胞核内检测到,但Cy3信号几乎消失.包裹Cy3的VLP用SDS-PAGE展开,荧光显像后行考马斯亮蓝(CBB)染色,发现Cy3和VLP移行至不同部位,证明Cy3不能与VP1结合,提示VLP以完整的颗粒形式转运进入细胞核.应用包裹外源性DNA的VLP感染培养的HeLa和SVG细胞,发现包裹的DNA在细胞浆和细胞核内均可检测到,提示JCV入核过程与VLP相同. 结论 VLP可以不经裂解直接转运进入细胞核,JCV入核转运可能与VLP相同.