人血清抗肺炎链球菌荚膜多糖抗体IgG定量ELISA方法的建立与验证

摘要

目的建立WHO推荐的检测人血清抗肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae）荚膜多糖抗体IgG定量ELISA（Pn Ps ELISA）。方法依照WHO推荐的Pn PS ELISA标准操作要求,优化荚膜多糖的包被浓度,筛选合格的ELISA板和二抗;在检测WHO参考实验室提供的质最控制血清验证实验条件的基础上,分别在WHO参考实验室和兰州生物制品研究所有限责任公司（LIBP）实验室检测16份由LIBP制备的质控血清中抗13种肺炎链球菌血清型（1、3、4、5、6A、6B、7F、9V、14、18C、19A、19F、23F）的荚膜多糖1gG抗体浓度。同时,在LIBP实验室建立了实验室内部质控血清907的检测范围,并评价了LIBP实验室实验间检测值的精确度。结果在WHO参考实验室和LIBP实验室分别检测的16份LIBP质控血清的抗13种肺炎链球菌血清型荚膜多糖IgG抗体浓度具有良好的相关关系（alope=0.94,r=0.97,P＜0.05）。LIBP实验室的检测值有81%落在WHO参考实验检测值±40%范围内,符合评价实验室之间所用方法的75%的数据在±40%的检测值范围内的标准。建立了LIBP实验室内部质控血清907的抗13种肺炎链球菌血清型荚膜多糖抗体IgG的检测值范围。LIBP实验室质控血清的各血清型IgG抗体浓度的实验间检测值的变异系数（CV）均＜30%。结论 LIBP实验室成功建立了WHO推荐的检测人血清中抗肺炎链球菌荚膜多糖抗体IgG定量ELISA方法,并确定了LIBP实验室日常用质控血清907的检测值范围。