构建肿瘤免疫治疗PD-L1靶向PET分子探针68Ga-NOTA-WL12及生物学观察

摘要

目的 构建程序性细胞死亡受体1(PD-1)靶向68Ga-NOTA-WL12分子探针,观察其生物分布,评价可否用于检测肿瘤PD-L1表达.方法 在60°C、pH 4.5条件下,以放射性核素68Ga标记多肽分子NOTA-WL12,利用放射性薄层色谱扫描仪(Radio-TLC)测定反应产物标记率.以活化C18柱对原始反应产物进行纯化并获得终产物,分析其放射化学纯度.以0.9％生理盐水及5％人血白蛋白(HAS)分析该分子探针的体外稳定性,并以脂水分布实验观察其分布.向正常雌性昆明鼠体内注射1.11 MBq 68Ga-NOTA-WL12,分别于其后5、30、60、120及240 min观察其体内分布.建立PD-1配体(PD-L1)表达阳性CHO-hPD-L1肿瘤模型和PD-L1表达阴性MDA-MB-231肿瘤模型,以小动物PET/CT显像观察该分子探针在体分布代谢,评价其可否用于检测肿瘤病灶内PD-L1表达.对CHO-hPD-L1肿瘤模型鼠行共注射阻断实验,观察肿瘤病灶摄取.结果 68Ga-NOTA-WL12分子探针标记率＞95％,放射化学纯度＞98％,体外稳定性良好;生物分布观察及PET/CT显像显示其主要通过肝肾代谢,肝肾存在非特异性摄取.注射后肿瘤病灶分子探针摄取先逐渐增高,后明显降低.结论 68Ga-NOTA-WL12体外稳定性良好,并能特异性地在小鼠模型PD-L1阳性肿瘤组织中浓聚.