液相色谱串联质谱检测尿醛固酮方法的建立

摘要

目的建立一种液相色谱串联质谱检测尿醛固酮（Aldosterone,ALD）的方法。方法方法学建立及评价。首先将尿液样本置于37℃温箱酸解,然后加入氘代同位素内标,再加入硫酸锌除蛋白,离心取上清,使用阴离子固相柱萃取,收集洗脱液,上机检测。在负离子模式下,经电喷雾电离,多离子反应监测模式下检测尿ALD。评价该方法的线性、精密度、回收率和检测限。通过检测80例患者24 h尿和血清ALD的含量,评估血尿ALD的相关性。应用本研究建立的LC-MS/MS法和索灵化学发光免疫法检测70例24 h尿标本,比较两种方法的相关性。招募114名表观健康人,研究尿ALD在表观健康人群中的分布。结果该方法的分析时间为4.5 min,在2～1000 pg/ml范围内线性良好（R~2＞0.990）;ALD的重复性和实验室内不精密度分别小于4.0%和5.0%;回收率结果为100.4%～108.2%;定量限为1 pg/ml。血ALD和尿ALD的检测结果呈正相关,相关系数r为0.396。化学发光免疫法（CLIA）与LC-MS/MS法共同测定70例24 h尿ALD的线性方程为:Y=0.998 8X+0.046 4（r=0.991）。LC-MS/MS法获得尿ALD在表观健康人群分布（P2.5～P97.5）为0.74～17.09μg/24 h。结论本研究建立了一种液相色谱串联质谱法测定尿ALD的方法并优化了尿ALD的酸解方法,该方法性能满足临床需求,且简便、快速、特异,可用于临床辅助诊断原发性醛固酮增多症。