COPD患者肺泡巨噬细胞源性MMP-9的表达及其酶活性变化

摘要

目的探讨TNFΑ对慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者肺泡巨噬细胞（AM）源性基质金属蛋白酶9（MMP-9）表达与酶活性的影响及其可能调节机制。方法从COPD患者支气管肺泡灌洗液中分离与培养AM,以0.1、1、5、10、20 NG/M L TNFΑ刺激24 H后,用半定量RT-PCR法检测MMP-9MRNA表达,明胶酶谱法检测MMP-9酶活性,凝胶阻滞分析实验检测NF-ΚB活性。结果当AM未被TNFΑ刺激时,MMP-9 MRNA表达吸光度比值为0.1826±0.0084,MMP-9酶活性的相对吸光度值为10 227±738。随着TNFΑ刺激剂量增加,MMP-9 MRNA表达相应增加,分别为0.4279±0.0204、0.5431±0.0058、0.6185±0.0208、0.6859±0.0080、0.7784±0.0208（P＜0.05）;MMP-9酶活性相应增强,分别为40 528±974、113 741±4547、190 696±4032、309 505±7639、427 305±9145（P＜0.05）。以10 NG/M L TNFΑ刺激AM后,NF-ΚB的活性较刺激前显著增强（P＜0.05）。结论TNFΑ能够诱导COPD患者AM表达MMP-9,TNFΑ诱导的AM源性MMP-9的表达可能与NF-ΚB介导的信号转导途径有关。