脂多糖对人腹膜间皮细胞葡萄糖转运蛋白-1表达的影响

摘要

目的:研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对人腹膜间皮细胞(HPMC)葡萄糖转运蛋白1(GLUT-1)表达的影响.方法:胰蛋白酶消化法进行HPMC的原代培养及传代;免疫组化法(ABC)用于GLUT-1的鉴定和半定量分析;采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测GLUT-1的mRNA表达;己糖激酶法用于葡萄糖浓度的测定,计算出培养液内葡萄糖的减少量作为细胞对糖的净利用.结果:(1)体外培养的HPMC细胞角蛋白用间接免疫荧光染色为绿色荧光,此为HPMC的特征;(2)LPS可以使正常糖浓度下(0.1%)HPMC GLUT-1的蛋白和mRNA的表达增加(P＜0.05),呈时间和浓度依赖,并伴有细胞对葡萄糖净利用增加,其中作用24 h后,浓度为100 μg/ml的LPS使GLUT-1的蛋白和mRNA表达最大(P＜0.01),而100 μg/ml组LPS作用24 h后,GLUT-1的蛋白和mRNA的表达最大(P＜0.01),作用36 h有所下降;(3)高糖条件下(4.25%),LPS可以使GLUT-1的蛋白和mRNA表达增加,与高糖组和正常对照相比有统计学差异(P＜0.05).结论:LPS可以使HPMCGLUT-1表达和葡萄糖摄取增加,这种作用在高糖条件下更为显著.这为研究和防治腹膜炎时腹透失超滤提供了线索.