他仑帕奈调控PI3K/Akt通路保护缺血性脑卒中大鼠神经功能的作用机制

摘要

目的 探讨新型非竞争性α氨基-3-羟基-5-甲基异噁唑-4丙酸(AMPA)受体拮抗剂他仑帕奈(TAL)对大鼠脑梗死缺血/再灌注(I/R)损伤的脑保护作用机制.方法 构建缺血性脑卒中大鼠模型,实验分为假手术(Sham)组、模型(Mod)组、他仑帕奈治疗组(TAL组),其中治疗组分为TAL 1 h、3 h、5 h 3个亚组,每组15只.Longa法评估神经功能;干/湿比重法计算脑组织含水量;氯化三苯基四氮唑(TTC)染色检测脑梗死率;苏木素-伊红(HE)染色海马组织,观察神经元形态;比色法检测海马组织天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(caspase-3和caspase-9)蛋白表达;蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测海马组织磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)磷酸化表达水平.结果 与Sham组相比,Mod组大鼠的神经功能受到严重损伤〔Longa评分(分):2.40±0.51比0±0,P<0.05〕,脑组织含水量显著增加〔(86.45±3.12)%比(70.96±2.04)%,P<0.05〕,脑梗死率显著上升〔(31.54±4.52)%比(0±0)%,均P<0.05〕;海马组织中caspase-3和caspase-9蛋白表达水平显著升高〔吸光度(A)值:3.19±0.44比1.05±0.12,2.18±0.21比0.76±0.09,均P<0.05〕,p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt表达水平显著降低(p-PI3K/PI3K:0.31±0.02比1.23±0.14,p-Akt/Akt:0.25±0.02比0.92±0.11,均P<0.05).与Mod组相比,TAL组大鼠神经功能损伤减轻,以1 h最为显著(1.27±0.59比2.40±0.51);脑组织含水量和脑梗死率显著下降,以1 h最为显著〔含水量:(75.68±1.46)%比(86.45±3.12)%,脑梗死率:(14.18±1.32)%比(31.54±4.25)%,均P<0.05〕;海马组织中caspase-3和caspase-9蛋白表达水平显著降低,以1 h最为显著(A值:1.98±0.16比3.19±0.44,1.09±0.07比2.18±0.21);p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt表达水平显著升高,以1 h最为显著(0.91±0.13比0.31±0.02,0.68±0.09比0.25±0.02,均P<0.05),1 h组更接近Sham组.结论 他仑帕奈可能通过激活PI3K/Akt通路,保护缺血性脑卒中大鼠神经功能.