清瘟败毒饮对脓毒症大鼠心肌组织IL-17信号通路相关基因表达的影响

摘要

目的 基于mRNA测序(RNA-seq)技术,采用生物学信息分析软件分析清瘟败毒饮对脓毒症大鼠心肌组织中白细胞介素-17(IL-17)信号转导通路相关基因表达的变化,阐明清瘟败毒饮对脓毒症心肌的保护机制.方法 清洁级健康雄性Wistar大鼠45只,随机分为脓毒症模型组、清瘟败毒饮组和假手术组,每组15只.采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制作脓毒症大鼠模型,假手术组仅开腹、关腹与复苏,不进行CLP.清瘟败毒饮组大鼠在制模前2?d给予清瘟败毒饮(组成:生地黄7.5?g,生石膏、水牛角各15?g,黄连2.5?g,栀子、桔梗、黄芩、知母、赤芍、玄参、连翘、甘草、丹皮、竹叶各5?g)胃饲,每日2次,术后继续中药灌胃24?h.3组术毕均予5?mL/kg平衡液肌肉注射.术后24?h取大鼠肌组织提取总RNA,采用RNA-seq技术对mRNA表达量进行检测,并应用京都基因和基因组数据库通路富集方法(KEGG?Pathway)分析清瘟败毒饮对脓毒症大鼠心肌组织IL-17信号通路相关基因表达的影响.结果 RNA-seq检测结果显示,与假手术组相比,脓毒症模型组大鼠心肌组织表达上调的基因有900个,下调的基因有1507个;清瘟败毒饮组大鼠心肌组织表达上调的基因有1288个,下调的基因有1870个.KEGG?Pathway分析结果显示,与假手术组相比,脓毒症模型组大鼠心肌组织IL-17信号通路相关基因表达上调的有10个,下调的有5个;清瘟败毒饮组大鼠心肌组织IL-17信号通路基因表达上调的有11个,下调的有6个.其中脓毒症模型组及清瘟败毒饮组同时上调的基因有7个〔CXC趋化因子配体(CXCL1、CXCL2)、白细胞介素-6(IL-6)、环氧合酶-2(COX-2)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、基质金属蛋白酶9?(MMP-9)、CCAAT/增强子结合蛋白β(C/EBPβ)〕;同时下调的基因有5个〔转化生长因子激酶1(TAK1)、核转录因子-κB(NF-κB)、泛素特异性蛋白酶25(USP25)、细胞外信号调节激酶(ERK)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(CASP)〕;脓毒症模型组上调而清瘟败毒饮组正常表达的基因有2个〔CXCL5、白细胞介素-1β(IL-1β)〕;?脓毒症模型组下调而清瘟败毒饮组正常表达的基因有1个〔热休克蛋白90(HSP90)〕;脓毒症模型组正常表达而清瘟败毒饮组上调的基因有3个〔激活蛋白-1(AP-1)、IκB激酶-β(IKK-β)、CC趋化因子7(CCL7)〕;脓毒症模型组正常表达而清瘟败毒饮组下调的基因有1个(ERK);脓毒症模型组上调而清瘟败毒饮组下调的基因有1个〔IκB激酶-α(IKK-α)〕;脓毒症模型组下调而清瘟败毒饮组上调的基因有1个〔NF-κB抑制因子-α(IκB-α)〕.结论 清瘟败毒饮可通过调节IL-17信号通路相关基因的表达,对脓毒症大鼠心脏起保护作用.