镉转化细胞DNA异常甲基化对肿瘤相关基因表达的影响

摘要

目的对镉转化细胞DNA异常甲基化及其对肿瘤相关基因表达的影响进行研究,探讨镉的外遗传致癌机制.方法从CdCl2转化BALB/c-3T3细胞中提取基因组DNA,经甲基化非敏感性酶(Mse1)单独消化或Mse1和甲基化敏感性酶(BstU1)联合消化,消化产物用甲基化敏感性内切酶指纹法(MSRF)进行分析,差异显示出异常甲基化基因片段,进一步以异常甲基化DNA为探针进行Southem分子杂交加以证实,并进行DNA序列测定,与基因文库中的基因进行类比分析.结果发现镉转化细胞存在异常甲基化DNA,其中一个甲基化DNA片段为p16抑癌基因.结论DNA高甲基化会导致基因表达抑制,因此,p16基因高甲基化会导致其抑癌功能减弱或丧失,这可能是镉诱导细胞转化及其致癌作用的一种外遗传机制.