三氯乙烯致敏豚鼠单核淋巴细胞中β-arrestin蛋白表达和核转录因子及激活蛋白-1活性的研究

摘要

目的测定三氯乙烯（TCE）致敏豚鼠外周血单核淋巴细胞（PBMC）中β-arrestin蛋白表达水平,核转录因子（NF-κB）和激活蛋白-1（AP-1）活性以及血清中肿瘤坏死因子（TNF-α）水平,探讨TCE致敏中免疫反应调节机制。方法根据豚鼠最大值试验方法 ,用TCE对豚鼠进行处理（TCE处理组,14只）,同时设立空白对照（5只）和DNCB阳性对照（7只）,对受试动物进行皮肤反应评分,据此判断致敏与否,并把TCE处理组分为TCE致敏组和TCE未致敏组。提取豚鼠外周血单核细胞（PBMC）,用免疫蛋白印迹（Western bloting）法检测β-arrestin蛋白表达水平,用电泳迁移率试验（EMSA）方法检测NF-κB和AP-1活性。酶联免疫吸附（ELISA）试剂盒检测血清中TNF-α水平。结果空白对照组豚鼠未见红斑或水肿,TCE组的部分豚鼠皮肤出现红斑和水肿,致敏率为71.4%,DNCB处理组所有动物皮肤出现明显红斑或水肿,致敏率为100%。空白对照、TCE未致敏组、TCE致敏组和DNCB处理组豚鼠PBMC中β-arrestin蛋白表达水平比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。与空白对照组和TCE未致敏组相比,TCE致敏组NF-κB活性明显升高,且差异有统计学意义（P＜0.05）;而各组豚鼠AP-1活性比较,差异尤统计学意义（P＞0.05）。TCE致敏组血清中TNF-α水平[（55.485±8.732）pg/ml]较空白对照组[（32.118±12.550）pg/ml]明显升高,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论以TCE致敏豚鼠β-arrestin和AP-1可能没被激活,而NF-κB被明显激活且在TCE致敏免疫反应中发挥着调节作用。