三甲基氯化锡诱导的非洲绿猴肾细胞蛋白质表达谱改变

摘要

目的分析三甲基氯化锡（trimethyltin chloride,TMT-Cl）诱导的非洲绿猴肾细胞（vero细胞）和正常vero细胞之间差异表达蛋白质,以寻找相关的标志物,探讨TMT-Cl所致肾损伤的分子机制。方法通过双向凝胶电泳和液相色谱-电喷雾线性离子阱质谱技术比较TMT-Cl染毒的vero细胞和正常vero细胞之间蛋白质表达谱的差异,蛋白免疫印迹技术分析其中的2个差异蛋白Annexin Al和α6-Tubulin的表达以验证双向电泳的结果,反转录荧光定量聚合酶链式反应技术进一步分析Annexin Al和α6-Tubulin在mRNA水平的表达。结果比较TMT-Cl染毒的vero细胞和正常vero细胞蛋白质表达谱,共获得15个差异蛋白点,9个通过质谱分析得到鉴定,3个上调,6个下调。与对照组比较,各TMT-Cl染毒组α6-Tubulin蛋白质和mRNA表达水平均下调,差异有统计学意义（P＜0.01）。与对照组比较,各染毒剂量组Annexin Al蛋白表达水平均上调,25和50μmol/L组mRNA表达水平下调,100μmol/L组的mRNA表达水平上调,差异均有统计学意义（P＜0.01）。结论双向凝胶电泳结合质谱分析筛选到的9个差异表达蛋白与TMT-Cl所致肾细胞毒性密切相关,可作为早期诊断、治疗及疗效评价的候选生物标志物。