Ac-SDKP对AngⅡ诱导的人胚肺MRC-5细胞向肌成纤维细胞分化的调节作用

摘要

目的研究N-乙酰基-丝氨酰-天门冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸（Ac-SDKP）对血管紧张素（Ang）Ⅱ诱导的人胚肺MRC-5成纤维细胞向肌成纤维细胞分化的调节作用。方法实验分为2部分:（1）采用不同浓度AngⅡ诱导48 h,采用100 nmol/LAngⅡ诱导不同时间点,免疫印迹法检测Ⅰ型胶原和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达;（2）实验分组为对照组、AngⅡ诱导组、Ac-SDKP干预组、cAMP直接激活的交换蛋白（Epac）蛋白特异性激活剂（8-Me-cAMP）干预组,免疫细胞化学染色法观察α-SMA的表达,免疫印迹法检测Ⅰ型胶原、α-SMA、血清反应因子（SRF）及其转录辅因子肌相关转录因子（MRTF）-A、Epac 1、2的表达。结果 AngⅡ能够明显诱导MRC-5细胞Ⅰ型胶原和α-SMA的表达,并具有一定的剂量和时间依赖效应。免疫细胞化学染色可见AngⅡ诱导组细胞质内出现明显的α-SMA阳性显色,同时诱导组SRF、MRTF-A、α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白表达上调,分别是对照组的3.4、3.5、3.3、6.8倍,Epacl蛋白表达下调,差异均有统计学意义（P＜0.05）;与AngⅡ诱导组比较,8-Me-cAMP干预组和Ac-SDKP干预组胞质内α-SMA阳性显色减弱,同时SRF、MRTF-A、α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白表达下调,Epacl蛋白表达上调,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 Ac-SDKP能够通过上调Epacl蛋白抑制AngⅡ诱导人胚肺MRC-5成纤维细胞向肌成纤维细胞分化。