姜黄素活化Nrf2-ARE通路对百草枯诱导Ⅱ型肺泡细胞氧化损伤的保护作用

摘要

目的研究姜黄素（curcumin）对百草枯（paraquat,PQ）诱导的Ⅱ型肺泡细胞氧化损伤的保护作用及机制。方法常规培养A549细胞,分空白对照组、姜黄素对照组、PQ组及姜黄素+PQ组,处理24h,MTT法检测细胞存活率、RT-PCR及Western blot法检测A549细胞NFE2L2表达、ELISA法检测细胞内HO-1、NQO-1及上清液超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活力及丙二醛（MDA）水平。并以siRNA技术低表达Nrf2,观察其对姜黄素拮抗PQ诱导A549细胞氧化损伤指标的影响。结果 0.1 mmol/L PQ即能明显抑制A549细胞生长,并呈剂量依赖性;而160μmol/L以下姜黄素对A549细胞生长无明显抑制作用。800μmol/L PQ组A549细胞SOD活力明显降低,CAT活力及MDA水平均明显升高,与空白对照组比较,差异有统计学意义（P＜0.05,P＜0.01）。80μmol/L姜黄素+PQ组,SOD及CAT活力较PQ组明显升高,MDA水平明显降低,差异有统计学意义（P＜0.01）。与对照组比较,PQ染毒组NFE2L2及其下游因子HO-1、NQO-1表达均明显升高,差异有统计学意义（P＜0.01）;姜黄素+PQ组NFE2L2及HO-1、NQO-1表达水平较PQ组升高,差异均有统计学意义（P＜0.01）。与姜黄素+PQ组比较,姜黄素+PQ+NFE2L2siRNA组SOD、CAT活力均明显下降,MDA水平明显升高,差异有统计学意义（P＜0.01）。结论小剂量姜黄素在体外能明显拮抗PQ诱导的A549细胞氧化损伤,这种保护作用依赖于Nrf2-ARE通路的活化。