沉默LncRNA TUG通过上调miR-24-5p表达增加乳腺癌细胞的放射敏感性

摘要

目的:探讨长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(LncRNA TUG1)对乳腺癌细胞放射敏感性的影响并探究其可能作用机制.方法:选取2015年4月至2016年3月于本院就诊的45例乳腺癌患者为研究对象,根据放疗后病灶变化情况分为放射敏感组(25例)与放射抵抗组(20例),qRT-PCR检测两组患者乳腺癌组织中TUG1表达水平.构建放射抵抗的乳腺癌细胞MCF-7R,通过不同剂量X射线照射MCF-7R细胞与乳腺癌MCF-7细胞,qRT-PCR检测MCF-7R、MCF-7细胞及人乳腺上皮细胞MCF-10A中TUG1的表达量.实验将MCF-7R细胞分为沉默TUG1组、沉默对照组、过表达miR-214-5p组、过表达miR-NC组、沉默TUG1+抑制miR-NC组、沉默TUG1+抑制miR-214-5p组.双荧光素酶报告实验验证TUG1与miR-214-5p的靶向作用关系.细胞克隆实验检测各组MCF-7R细胞存活率的影响;流式细胞术实验检测各组MCF-7R细胞的凋亡率.结果:TUG1在MCF-7R细胞中的表达水平较MCF-10A、MCF-7细胞明显升高;沉默TUG1表达可降低MCF-7R细胞存活,促进细胞凋亡;TUG1可负向调控miR-214-5p表达;miR-214-5p在MCF-7R细胞中的表达水平较MCF-10A、MCF-7细胞明显降低,miR-214-5p过表达可减少MCF-7R细胞存活分数,促进放射诱导的乳腺癌细胞凋亡;但抑制miR-214-5p表达可增加MCF-7R细胞存活分数,抑制细胞凋亡.结论:沉默TUG1可通过上调miR-214-5p表达进而增加乳腺癌细胞的放射敏感性.