新型酵母表达系统-Pichia.pastoris高效分泌型表达病毒生长因子的研究

摘要

目的:实现痘苗病毒生长因子的高效分泌型表达.方法:构建pPIC9K/VGF表达载体,扩增引物分别为P1:TATACGTAGATAGTGGTAACG,P2:TAGAATTCTTAAGTGTTTGGTTTT;采用Pichia.pastoris酵母表达系统.结果:经酶切鉴定,证明克隆的基因是正确的;经SDS-PAGE分析,证明转化基因组中确实整合有VGF基因,其分子量为 9.6 kD;得到了高效分泌型VGF高产菌株,目的蛋白占培养液上清蛋白总量的80%以上,产量为0.45 g/L.结论:证实可以通过Pichia.pastoris系统制备可溶性痘苗病毒生长因子,为大规模工业生产打下基础.