DNA疫苗诱导健康小鼠细胞免疫及HBV转基因小鼠抗-HBs产生

摘要

目的:在HBV DNA疫苗成功地诱导健康小鼠体液免疫应答的基础上,探讨其作为抗-HBV治疗的可行性及作用机理.方法:应用基因重组技术,构建编码HBV中蛋白(preS2+S)及人白细胞介素融合蛋白基因的真核表达质粒pS2.s及pFP,继经肌注免疫健康Balb/c及HBV转基因(Tg)小鼠并观察健康小鼠细胞免疫应答及HBVTg小鼠HBsAg的血清转换.结果:1.体外HBsAg对DNA疫苗免疫后的T细胞的刺激呈浓度相关,HBsAg30μg/ml时刺激pS2.S免疫小鼠脾细胞增殖指数(5.6±0.9)明显较pcDNA3.1组(2.0±0.5)高.细胞培养上清液细胞因子水平检测结果:免疫实验组IL-2及IFN-γ的分泌水平明显较对照组高,而IL-4水平于各组影响不明显.2.pS2.S免疫小鼠局部引流淋巴结DCs诱导HBsAg致敏的T-细胞增殖指数(4.20)较pcDNA3.1组(2.55高).3.高剂量的pS2.S组与联合pFP组各有一只Tg小鼠分别于2、4 w开始发生HBsAg血清转换,且其抗体水平随时间而增长.结论:结果表明HBV DNA疫苗能有效诱导HBsAg特异性的细胞免疫应答;HBV-Tg小鼠初步实验结果为治疗型HBV DNA疫苗的深入研制提供了实验依据.