缝隙连接蛋白Cx43介导高糖诱导的气道上皮结构受损

摘要

目的:探讨缝隙连接蛋白(Connexin43,Cx43)在高糖(High glucose,HG)诱导气道上皮结构受损的相关调节机制.方法:构建突变的Cx43磷酸化载体pEGFP-N1-Cx43279-MU、pEGFP-N1-Cx43365-MU和pEGFP-N1-Cx43368-MU,转染正常人支气管上皮细胞16HBE,给予高糖刺激,Western blot法、Real-time PCR法测定Cx43的蛋白及mRNA水平,Western blot法测定紧密连接蛋白(Zonula occludens-1,ZO-1)及黏附连接蛋白(E-cadherin)的表达,激光共聚焦检测ZO-1的表达及定位.结果:与对照组相比,HG刺激后Cx43 mRNA表达及蛋白含量均降低,ZO-1及E-cadherin的表达亦明显降低,均低于对照组(P＜0.05).转染Cx43磷酸化突变载体pEGFP-N1-Cx43279-MU、pEGFP-N1-Cx43365-MU和pEGFP-N1-Cx43368-MU的细胞经HG刺激后,Cx43表达明显增强,显著高于单纯HG组(P＜0.05),同时伴随ZO-1及E-cadherin的表达的增强(P＜0.05).结论:缝隙连接蛋白Cx43参与了HG诱导的气道上皮结构受损,是气道上皮机械防御屏障的重要调控分子.