急性丙型肝炎患者病毒株部分基因克隆及其序列分析

摘要

目的探讨ＨＣＶ感染在肝炎发生中的病原学作用。方法对８９例急性肝炎进行ＨＣＶ标志物分析，并从ＨＣＶ ＲＮＡ阳性的５例非甲非乙型急性肝炎患者血清中提取ＨＣＶ ＲＮＡ，经随机引物逆转录合成ｃＤＮＡ，先以型别特异的ＰＣＲ 法分型，再用巢式ＰＣＲ扩增部分核心基因区序列，将产物连接Ｐ－ＧＥＭ－Ｔ载体，在大肠杆菌中表达后测序分析。结果非甲非乙型急性肝炎中ＨＡＶ、ＨＢＶ和ＨＣＶ阳性分别占４７．２％、２８．１％和１５．７％，ＨＡＶ和ＨＢＶ双重感染占 １４．６％，非甲、非乙和非丙肝炎占９％； ＨＣＶ分型显示Ⅱ型、 Ⅲ型和Ⅱ／Ⅲ混合型分别占８５８％、７１％和７１％； Ⅱ型血清用于序列分析，扩增序列４２４ｈＰ与原设计完全一致。急性肝炎株间核苷酸同源性在９８１％～９９５％。氨基酸同源性在９７．６％～９９．２％；前者的同源性在１型为９１．９０／０，在Ⅱ型为９４３％～９５．６％；后者与Ⅰ型、Ⅱ型的同源性在９２．３％～９５８％。结论ＨＣＶ为引起非甲非乙型急性肝炎的主要病毒之一，以Ⅱ型为主，应引起临床重视。