微小RNA-101a抑制IRE1α信号通路调控肝星状细胞诱导的肝纤维化

摘要

目的 探讨微小RNA-101a(miRNA-101a)是否通过调控肌醇需要酶1α蛋白(IRE1α)信号通路介导肝星状细胞活化以及对肝纤维化的影响.方法 建立CCl4诱导的小鼠肝纤维化模型,实时定量PCR检测肝组织中miRNA-101a的表达,Western印迹法检测α平滑肌肌动蛋白(αSMA)、Ⅰ型胶原、IRE1α的蛋白表达.肝星状细胞(HSC)-T6处理分为HSC组、转化生长因子(TGF) β1活化组、TGFβ1+ miRNA-NC组(转染miRNA-101a空白对照质粒)和TGFβ1+ miRNA-M组(转染miRNA-101a模拟质粒).给予对应干预后,检测各组间miRNA-101a、αSMA、Ⅰ型胶原和IRE1α的表达差异.结果 与对照组小鼠相比,实验组小鼠肝组织中纤维沉积明显[(0.17±0.06)％比(2.09±0.39)％],miRNA-101a相对表达水平下调[(1.00±0.05)比(0.43±0.05)],差异有统计学意义(均P＜0.001);而且实验组小鼠肝组织αSMA、Ⅰ型胶原及IRE1α蛋白相对表达水平上调[(1.00±0.23)比(4.09±0.80)、(1.00±0.21)比(4.98±1.19)、(1.00±0.24)比(3.27±0.65)],差异有统计学意义(均P＜0.001).TGFβ1处理抑制HSC-T6细胞miRNA-101a表达,诱导HSC-T6活化,导致αSMA、Ⅰ型胶原以及IRE1α蛋白表达上调;TGFβ1+ miRNA-M组中miRNA-101a表达水平(1.89±0.20)明显高于TGFβ1+ miRNA-NC组(0.59±0.19),差异有统计学意义(P＜0.001).过表达miRNA-101a后,αSMA、Ⅰ型胶原蛋白表达明显降低[(2.65±0.69)比(0.84±0.13)、(3.15±0.59)比(1.31±0.25)],差异有统计学意义(均P＜0.05);IRE1α蛋白表达亦下调[(2.63±0.47)比(1.03±0.15)],差异有统计学意义(P＜0.001).结论 miRNA-101a可能通过抑制IRE1α信号通路抑制肝星状细胞活化和肝纤维化形成.