声明
中英文缩写词对照
1 前言
2 实验材料
2.1实验细胞与动物
2.2试剂与药品
2.3设备与仪器
3 实验方法
3.1大鼠肝纤维化模型的建立
3.2 SD大鼠血样本指标的检测
3.2.1 检测SD大鼠血样本AST
3.2.2 检测SD大鼠血样本ALT
3.2.3 检测SD大鼠血样本TBIL
3.2.4 检测SD大鼠血样本ALB
3.3.2大鼠肝组织Masson染色
3.3.3大鼠肝组织免疫组织化学染色
3.4细胞培养
3.4.1 人肝星状细胞LX-2的复苏与培养
3.4.2人肝星状细胞LX-2的传代
3.5 MTT法
3.6Western blot
3.6.1大鼠肝组织/细胞总蛋白的提取
3.6.2 BCA总蛋白定量
3.6.3实验中所用液体的配制
3.6.4聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)
3.6.5转膜(湿转法)
3.6.6蛋白免疫印迹
3.7.1提取大鼠肝组织/细胞总RNA
3.7.2 RNA的定量
3.7.3 cDNA的合成
3.7.4引物的序列
3.8数据处理
4 实验结果
4.1.1奥曲肽对大鼠肝纤维化模型病理学改变的影响
4.1.2奥曲肽对大鼠肝纤维化模型血清相关指标变化的影响
4.2 奥曲肽对大鼠肝纤维化模型中α-平滑肌肌动蛋白和Ⅰ型胶原表达变化的影响
4.2.2 免疫组织化学检测 α-平滑肌肌动蛋白和Ⅰ型胶原在大鼠肝纤维化模型中的表达变化
4.3 奥曲肽对大鼠肝纤维化模型中Wnt1、β-连环蛋白、c-Myc和细胞周期蛋白D1表达水平的影响
4.3.1Western blot和(或)qRT-PCR检测Wnt1、c-Myc、β-连环蛋白和细胞周期蛋白D1在大鼠肝纤维化模型中的表达变化
4.3.2 免疫组化检测Wnt1和β-连环蛋白在大鼠肝纤维化模型中的表达变化
4.4 奥曲肽对人肝星状细胞LX-2增殖的影响
4.4.1 奥曲肽对人肝星状细胞LX-2毒性的检测
4.4.2奥曲肽对活化的人肝星状细胞LX-2增殖的影响
4.5奥曲肽对人肝星状细胞LX-2中α-平滑肌肌动蛋白和I型胶原表达变化的影响
4.6 奥曲肽对人肝星状细胞 LX-2 中 Wnt1、c-Myc、β-连环蛋白和细胞周期蛋白D1水平变化的影响
讨论
结论
参考文献
附录
致谢
综述:Wnt信号通路在肝纤维化中的研究进展