miR-181b调控靶基因TIMP-3对肝癌细胞侵袭迁移能力的影响

摘要

目的探讨miR-181b对靶基因的金属蛋白酶组织抑制因子-3（tissue inhibitor of metalloproteinases-3,TIMP-3）的调控作用及其对肝癌细胞体外侵袭迁移能力的影响。方法采用qRT-PCR检测肝细胞癌（HCC）组织和不同人HCC细胞系中miR-181b的表达。Western-blot检测TIMP-3在HCC中蛋白的表达。选择miR-181b高表达HCC细胞系SKHep-1,通过报告基因检测试验,观察miR-181b对TIMP-3的调控作用。分别通过Transwell小室和细胞划痕试验,观察阻断SKHep-1细胞miR-181b表达对其侵袭、迁移能力的影响。结果 miR-181b在HCC组织中mRNA的表达明显高于癌旁组织和正常肝组织（P＜0.01）,其高表达与HCC高侵袭转移密切相关（P＜0.01）。TIMP-3在HCC中蛋白表达明显低于癌旁组织和正常肝组织（P＜0.05）。miR-181b在人HCC细胞Hep3B、HepG2、Huh-7、SKHep-1、SNU182、SNU449和肝细胞中均有表达,其中在SKHep-1中表达最高（P＜0.01）。高表达miR-181b抑制带有TIMP-3’UTR的荧光素酶的表达（P＜0.05）,抑制miR-181b不仅能降低SK-hepl的HCC细胞迁移能力（P＜0.05）,还可降低其侵袭能力（P＜0.01）。结论 miR-181b可能通过下调TIMP-3基因表达促进HCC侵袭和迁移能力。