阿霉素增强TRAIL诱导的人骨髓瘤细胞系KM3细胞凋亡的分子机制研究

摘要

目的探讨阿霉素增强肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRA1L）诱导人骨髓瘤细胞系KM3细胞凋亡的分子机制。方法采用 TUNEL 法和流式细胞术比较单独 TRAIL 及联合应用阿霉素对 KM3细胞凋亡率的影响。Western blot 法检测阿霉素诱导前后 KM3细胞核内转录因子 NF-κB亚单位蛋白 P65以及死亡受体 DR5表达的变化。结果流式细胞术分析显示,10、20、50、100 ng/ml 的TRAIL 联合应用1 μg/ml 阿霉索诱导 KM3细胞后,细胞凋亡率分别为20.88%、40.03%、57.87%和60.82%,显著高于单独应用阿霉素或 TRAIL 诱导的细胞凋亡率;与 TUNEL 法检测结果一致。KM3细胞经不同浓度阿霉索（0.5、1.0、2.0、4.0μg/ml）联合20 ng/ml TRAIL 处理后,DR5受体的表达量随应用阿霉素浓度的增加而上升,而细胞核内 P65蛋白表达量则随阿霉素浓度的增加而下降。结论骨髓瘤细胞膜 DR5表达量提高和 NF-κB的核转移是阿霉素协同 TRAIL 诱导凋亡反应的重要分子机制。