人工抗原呈递细胞诱导CML28特异性T淋巴细胞杀伤急性白血病细胞的研究

摘要

目的探讨以人工抗原呈递细胞模拟树突细胞（DC）体外诱导特异性T淋巴细胞活化、增殖,观察特异性T淋巴细胞杀伤白血病细胞的效应。方法用慢性粒细胞白血病细胞特异性抗原肽（CML28）作为目标肽,并以磁珠同时负载人工合成的HLA-A2-Ig二聚体一抗原肽（CML28）复合物以及B7-1分子,作为诱导T淋巴细胞的活化、增殖的双信号分子,模拟抗原呈递细胞的生物功能,建立一种人工抗原呈递细胞;从HLA-A2健康骨髓捐献者骨髓或外周血中分离出单个核细胞作为效应细胞,并与人工抗原呈递细胞共孵育,以流式细胞术检测特异性T淋巴细胞活化、增殖程度。以初治急性白血病细胞作为靶细胞,将特异性T淋巴细胞与白血病细胞分别以5:1,10:1,20:1,40:1,80:1比例共孵育4h,用乳酸脱氢酶（LDH）释放实验检测杀伤急性白血病细胞的效果。结果以该人工抗原呈递细胞刺激T淋巴细胞后,其CML28特异性T淋巴细胞比例明显增高,实验组中抗原肽ALFCGVACA、FLQGDTSVL、DLMSSTKGL、VLTFALDSV所诱导的特异性T淋巴细胞比例分别为（13.5±1.6）%、（15.2±1.5）%、（14.7±1.8）%、（34.3±3.5）%,与对照组[（2.2±0.4）%]比较,差异均有统计学意义（P＜0.01）。当效应细胞与靶细胞分别以5:1,10:1,20:1,40:1,80:1混合后,随着效应细胞的增加,诱导杀伤急性白血病细胞效率也明显增强,与对照组比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论以磁珠为平台的人工抗原呈递细胞能有效模拟人抗原呈递细胞,诱导T淋巴细胞特异性杀伤白血病细胞,为白血病的免疫治疗提供了一种新的途径。