磷酸钠协同转运蛋白基因SLC34A2的真核表达重组载体的构建及鉴定

摘要

目的 构建磷酸钠协同转运蛋白基因SLC34A2的真核表达重组载体pcDNA3.1(+),并进行酶切鉴定.方法 查得人SLC34A2 cDNA全序列,设计合成相应特异性引物,引入BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点,通过RT-PCR获得SLC34A2基因,定向插入真核表达载体pcDNA3.1(+)多克隆酶切位点中,构建重组体pcDNA3.1(+)-SLC34A2,通过酶切分析,PCR及测序鉴定,筛选阳性重组体.结果 从正常肺组织中逆转录扩增出的SLC34A2基因,大小约为2 073 bp,经双酶切及测序鉴定证明成功构建了SLC34A2真核表达重组载体pcDNA3.1(+)-SLC34A2.结论 RT-PCR 扩增得到了大小约为2 073 bp 的SLC34A2基因;并成功构建了pcDNA3.1(+)-SLC34A2 真核表达重组载体.