低强度脉冲超声对立体培养的人退变髓核细胞的影响

摘要

目的 探讨低强度脉冲超声对三维立体培养的人退变髓核细胞的作用.方法 取人腰椎退变髓核组织,进行髓核细胞的分离、培养、鉴定,取P3代细胞转至藻酸钙凝珠后予以不同超声强度(0、15、30、60、120 mW/cm2)的脉冲超声刺激1 w(20 min/d).分别应用流式细胞仪检测细胞凋亡率,RT-PCR及Western blot法检测细胞中聚集蛋白多糖和Ⅱ型胶原在mRNA及蛋白水平的表达差异.结果 超声强度为30、60、120 mW/cm2组的细胞凋亡率较对照组(0 mW/cm2)低(P＜0.05),超声强度为15 mW/cm2组与对照组相比差异无显著性(P＞0.05)；在mRNA及蛋白表达水平上,30、60、120 mW/cm2组较对照组均有显著性差异(P＜0.05),组间比较无显著性差异(P＞0.05).结论 低强度脉冲超声能抑制体外藻酸钙凝珠立体培养的人退变髓核细胞凋亡,促进细胞合成细胞外基质(聚集蛋白多糖和Ⅱ型胶原),从而延缓或修复椎间盘退变.