PTD4－Apoptin 融合蛋白可溶性表达及其对Hela细胞的抑制作用

摘要

目的：构建PTD4－Apoptin 融合蛋白的原核表达载体并表达蛋白，检测其对Hela细胞的生长抑制作用。方法人工合成 Apoptin 序列和PTD4序列，构建pGEX－6p－1－PTD4－Apoptin 原核表达载体，使其在 E．coli BL21（DE3）中表达。使用GST 亲和层析柱纯化融合蛋白，并使用超滤管浓缩纯化后的目的蛋白，得到高浓度的融合蛋白。向 Hela 细胞中加入融合蛋白，检测其对Hela 细胞的生长抑制作用。结果 PTD4－Apoptin 融合蛋白在大肠杆菌中可溶性表达成功，对Hela细胞生长具有抑制作用，PTD4－Apoptin对Hela细胞抑制率达82．34％。结论成功构建PTD4－Apoptin融合蛋白表达载体，并表达可溶性的融合蛋白，PTD4－Apoptin 对Hela 细胞具有明显的抑制作用。